Diagnosis molekuler sesuai dengan seperangkat teknik molekuler yang bertujuan untuk mengidentifikasi perubahan dalam DNA yang bisa menjadi indikasi penyakit genetik atau kanker, misalnya. Selain itu, teknik molekuler banyak digunakan untuk identifikasi dan konfirmasi penyakit menular, karena mereka mewakili metode diagnosis yang lebih cepat dan lebih akurat.
Diagnosis molekuler mahal dan, oleh karena itu, tidak diminta sangat sering oleh dokter, namun, itu memberikan hasil yang akurat sehubungan dengan adanya perubahan, cara itu dapat mengganggu fungsi organisme dan respon pasien terhadap perawatan.
Untuk apa ini?
Diagnosis molekuler dapat dilakukan dengan beberapa tujuan, yang utama adalah:
- Identifikasi mutasi terkait leukemia, seperti identifikasi translokasi BCR-ABL, yang merupakan karakteristik dari Leukemia Myeloid Kronis (CML); Mutasi karakteristik penyakit hematologi, seperti hemochromatosis herediter, polycythemia vera, trombositemia esensial dan trombofilia, misalnya Perubahan molekuler yang mengindikasikan terjadinya kanker, seperti kanker kolorektal, paru-paru, payudara dan otak, misalnya; Diagnosis penyakit menular, seperti hepatitis, uretritis, toksoplasmosis, leishmaniasis, dll., Selain identifikasi virus HPV.
Diagnosis molekuler, meskipun dianggap mahal jika dibandingkan dengan teknik diagnostik lainnya, lebih akurat, karena mampu menginformasikan perubahan yang terkait dengan penyakit tertentu dan tingkat pengaruh perubahan ini dalam tubuh, sehingga membantu perawatan orang tersebut.
Selain digunakan untuk diagnosis berbagai penyakit, teknik molekuler juga digunakan untuk menilai tanggapan terhadap pengobatan, terutama pada orang dengan kanker, menjadi salah satu metode yang paling efektif untuk menunjukkan perkembangan penyakit dan kambuh.
Bagaimana ini dilakukan
Diagnosis molekuler dapat dilakukan dengan sampel apa pun, yang diminta oleh dokter yang paling dapat memberikan informasi tentang kondisi pasien, yang dapat berupa urin, saliva atau, dalam kebanyakan kasus, darah. Tidak perlu berpuasa atau persiapan lain untuk ujian.
Sampel dikumpulkan dan dikirim ke laboratorium bersama dengan bimbingan dokter menginformasikan ujian atau jenis penelitian yang harus dilakukan. Teknik molekuler yang dilakukan tergantung pada pemeriksaan yang diminta dan melibatkan serangkaian prosedur tepat yang bertujuan untuk mengidentifikasi ada atau tidaknya perubahan yang diminta oleh dokter.
Biasanya hanya sejumlah kecil sampel yang dikirim yang digunakan, sisanya disimpan sehingga, jika perlu, ujian diulang.
Lihat apa saja teknik molekuler utamanya
PCR
PCR, kependekan dari Polymerase Chain Reaction atau Polymerase Chain Reaction , adalah teknik molekuler yang terdiri dari pengamplasan suatu fragmen materi genetik, baik DNA atau RNA, dengan tujuan mengidentifikasi mutasi dan, dengan demikian, membantu dalam diagnosis penyakit..
Teknik ini dibuat dari ekstraksi dan pemurnian bahan genetik, yang kemudian ditempatkan dalam campuran di mana salah satu komponennya adalah enzim restriksi yang bervariasi sesuai dengan pemeriksaan yang diminta dan yang fungsinya adalah memotong bahan menjadi fragmen. sehingga kemungkinan perubahan genetik dapat diidentifikasi. Campuran ditempatkan dalam thermocycler, yang merupakan alat yang bertindak melalui variasi suhu yang ditunjukkan oleh profesional sesuai dengan ujian dan, dengan demikian, memungkinkan amplifikasi fragmen genetik. Dalam kasus PCR konvensional, setelah amplifikasi, produk PCR mengalami elektroforesis, yang merupakan teknik molekuler berdasarkan berat dan ukuran fragmen, yaitu, sesuai dengan karakteristik ini, pola pita dihasilkan, yang analisisnya dibuat berdasarkan pada pita kontrol positif, yaitu pita yang diketahui berhubungan dengan perubahan genetik.
PCR waktu nyata, juga disebut qPCR, adalah jenis PCR kuantitatif, yaitu, selain mengidentifikasi perubahan genetik, ia dapat memberikan informasi tentang ekspresi gen, yaitu, seberapa banyak gen yang diubah diekspresikan dalam organisme. dengan demikian, dapat digunakan untuk membantu diagnosis dan memantau pengobatan. PCR waktu-nyata tidak memerlukan elektroforesis, seluruh proses memperkuat dan menganalisis materi genetik dilakukan oleh perangkat dan hasilnya ditafsirkan oleh seorang profesional kesehatan yang terlatih.
Sequencing
Sequencing adalah teknik molekuler yang terdiri dari menentukan urutan nukleotida DNA, yang merupakan unit pembentuk materi genetik. Sekuensing terjadi dari reaksi yang mirip dengan PCR, namun, dalam campuran amplifikasi, nukleotida termodifikasi ditambahkan dengan penambahan fluorokrom, yang ketika bahan diamplifikasi, nukleotida termodifikasi dimasukkan ke dalam DNA dan menghasilkan beberapa fragmen, yang sesuai dengan produk sekuensing.
Produk reaksi ditempatkan dalam suatu alat yang disebut sekuensing DNA, di mana, ketika serpihan-serpihan itu dicapai oleh laser peralatan, fluorochrom tereksitasi, memancarkan fluoresensi, yang ditunjukkan oleh peralatan melalui puncak, dengan masing-masing puncak sesuai. ke nukleotida. Pada akhir reaksi, peralatan akan menginformasikan urutan DNA, sehingga dapat membantu dokter dalam diagnosis penyakit genetik.
